來源：正道高級(jí)完全中學(xué) 發(fā)布時(shí)間：2014-05-28 11:10:00 瀏覽：8385
實(shí)驗(yàn)八葉綠體色素的提取和分離（必修一P97）
一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>
1．嘗試用過濾方法提取葉綠體中的色素和用紙層析法分離提取到的色素。
2．分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，探究葉綠體中有幾種色素，以及各自所呈現(xiàn)的顏色。
二．實(shí)驗(yàn)原理：
1．葉綠體中的色素是有機(jī)物，不溶于水，易溶于丙酮等有機(jī)溶劑中，所以用丙酮、乙醇等能提取色素。
2．層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢。所以用層析法來分離四種色素。
三、實(shí)驗(yàn)材料：幼嫩、鮮綠的菠菜葉
四、實(shí)驗(yàn)步驟：
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步 驟 |
注 意 問 題 |
分 析 |
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1．提取色素 5克綠葉剪碎，放入研缽，加SiO2、CaCO3和5mL丙酮（或10mL無水乙醇）迅速、充分研磨。（若沒有無水乙醇，也可用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇，但要加入適量的無水碳酸鈉，除去水分） |
加SiO2 加CaCO3
加丙酮 迅速 |
加SiO2為了研磨得更充分。 加CaCO3防止研磨時(shí)葉綠素受到破壞。因?yàn)槿~綠素含鎂，可被細(xì)胞液中的有機(jī)酸產(chǎn)生的氫代替，形成去鎂葉綠素，CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機(jī)酸，防止葉綠體被破壞。 葉綠體色素易溶于丙酮等有機(jī)溶劑。 減少研磨過程葉綠素的分解，減少有毒性的丙酮揮發(fā)。 |
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2．收集濾液 漏斗基部放一單層尼龍布，研磨倒入漏斗內(nèi)擠壓，將濾液收集到小試管中，用棉花塞塞住試管口。 |
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尼龍布起過濾作用。
試管口用棉花塞塞緊是為了防止丙酮揮發(fā)。 |
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3．制備濾紙條 將干燥的濾紙，順著紙紋剪成長(zhǎng)10cm，寬1cm的紙條，一端剪去二個(gè)角，并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。 |
干燥 順著紙紋剪成長(zhǎng)條 一端剪去二個(gè)角 |
可吸收更多的濾液。 層析時(shí)，色素分離效果好。 可使層析液同時(shí)到達(dá)濾液細(xì)線。 |
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4．劃濾液細(xì)線 用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線劃出細(xì)、齊、直的一條濾液細(xì)線，干后重復(fù)三次。 |
濾液細(xì)線越細(xì)、越齊越好。 重復(fù)三次。 |
防止色素帶之間部分重疊。
增加色素在濾紙上的附著量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更明顯。 |
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5．紙層析法分離色素 將3mL層析液倒入燒杯中，將濾紙條（劃線一端朝下）插入層析液中，用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。 |
層析液不能沒及濾紙條。 燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。 |
防止色素溶解在層析液中，
層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。 |
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6．觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果
由上至下分別為： 胡蘿卜素（橙黃色） 葉黃素（黃色） 葉綠素a（藍(lán)綠色） 葉綠素b（黃綠色）
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擴(kuò)散最快是胡蘿卜素，擴(kuò)散最慢是葉綠素b，含量最多的是葉綠素a。
四種色素之所以能被分離，是因?yàn)樗姆N色素隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度不同。
1．濾紙條上的濾液細(xì)線，為什么不能觸及層析液？
答：濾紙條上的濾液細(xì)線如觸及層析液，濾紙上的葉綠體色素就會(huì)溶解在層析液中，實(shí)驗(yàn)就會(huì)失敗。
2．提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么？
答：提取葉綠體色素的關(guān)鍵是：①葉片要新鮮、濃綠；②研磨要迅速、充分；③濾液收集后，要及時(shí)用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關(guān)鍵是：一是濾液細(xì)線要細(xì)且直，而且要重復(fù)劃幾次；二是層析液不能沒及濾液線。
實(shí)驗(yàn)九 探究酵母菌的呼吸方式（必修一P91）
一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>
1．了解酵母菌的無氧呼吸和有氧呼吸情況
2．學(xué)會(huì)運(yùn)用對(duì)比實(shí)驗(yàn)的方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)
二．實(shí)驗(yàn)原理：
1．酵母菌是一種單細(xì)胞真菌，在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。方程式（略）
2． CO2可使澄清石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時(shí)間長(zhǎng)短，可以檢測(cè)酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。
3．橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，在酸性條件下，變成灰綠色。
三．方法步驟：
提出問題→作出假設(shè)→設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)→（包括選擇實(shí)驗(yàn)材料、選擇實(shí)驗(yàn)器具、確定實(shí)驗(yàn)步驟、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)記錄表格）→實(shí)施實(shí)驗(yàn)→分析與結(jié)論→表達(dá)與交流。
1．酵母菌培養(yǎng)液的配制
取20g新鮮的食用酵母菌，分成兩等份，分別放入錐形瓶A（500mL）和錐形瓶B（500mL）中 ，再分別向瓶中注入240mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的葡萄糖溶液
2．檢測(cè)CO2的產(chǎn)生
用錐形瓶和其他材料用具組裝好實(shí)驗(yàn)裝置（如圖），并連通橡皮球（或氣泵），讓空氣間斷而持續(xù)地依次通過3個(gè)錐形瓶（約50min）。然后將實(shí)驗(yàn)裝置放到25-350C的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。
3．檢測(cè)灑精的產(chǎn)生
各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液，分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（體積分?jǐn)?shù)為95%-97%）并輕輕振蕩，使它們混合均勻，觀察試管中溶液的顏色變化。
實(shí)驗(yàn)十 觀察細(xì)胞的有絲分裂（必修一P115）
一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>
1．制作洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片
2．觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程，識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期，比較細(xì)胞周期不同時(shí)期的時(shí)間長(zhǎng)短。
3．繪制植物細(xì)胞有絲分裂簡(jiǎn)圖。
二．實(shí)驗(yàn)原理：
1．在高等植物體內(nèi)，有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個(gè)細(xì)胞的分裂是獨(dú)立進(jìn)行的，因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞。
2．染色體容易被堿性染料（如龍膽紫溶液）著色，通過在高倍顯微鏡下觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體（或染色質(zhì)）的存在狀態(tài)，就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期，進(jìn)而認(rèn)識(shí)有絲分裂的完整過程。
三．實(shí)驗(yàn)材料： 洋蔥（可用蔥、蒜代替）。因?yàn)楦馍L(zhǎng)點(diǎn)屬于分生組織，細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易觀察到有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞。
四．實(shí)驗(yàn)步驟：
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步 驟 |
注 意 問 題 |
分 析 |
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一、根尖的培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn)前3~4天，讓洋蔥放在廣口瓶上，底部接觸清水。根長(zhǎng)約5cm時(shí)可用。 |
置于溫暖處，常換水。 |
因?yàn)榧?xì)胞分裂和生長(zhǎng)需要水分、適宜的溫度和氧氣。 |
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二、裝片的制作 （解離→漂洗→染色→制片） 1．解離：上午10時(shí)至下午2時(shí)，剪取洋蔥根尖2~3mm，立即放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，室溫下解離3~5min。 |
解離時(shí)間要保證，細(xì)胞才能分散開來。
解離時(shí)間也不宜過長(zhǎng)。 |
目的：溶解細(xì)胞間質(zhì)，使組織中的細(xì)胞相互分離開來。此時(shí)，細(xì)胞已被鹽酸殺死。 否則，根尖過于酥軟，無法取出。 |
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2．漂洗：待根尖酥軟后，用鑷子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10 min。 |
漂洗要充分，可換水1~2次。
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目的：洗去解離液，便于染色。
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3．染色：把洋蔥根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。 |
染色時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則顯微鏡下一片紫色，無法觀察。 |
龍膽紫等為堿性染料，可使染色體著色。 醋酸洋紅溶液也能使染色體著色 |
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4．制片：用鑷子將這段洋蔥根尖取出來，放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片。然后，用拇指輕輕地壓載玻片，使細(xì)胞分散開來。 |
要弄碎根尖，再垂直向下均勻用力壓片，不可移動(dòng)蓋玻片， |
目的：使細(xì)胞分散，避免細(xì)胞重疊，便于觀察。做得成功的裝片，標(biāo)本被壓成云霧狀。 |
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三、觀察 1．低倍鏡觀察：把裝片放在低倍鏡 下，慢慢移動(dòng)裝片，找到分生區(qū)細(xì)胞。
2．高倍鏡觀察：移走低倍鏡，換上高倍鏡，用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，仔細(xì)觀察，找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞，再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。 |
一定要找到分生區(qū)。
在一個(gè)視野里，往往不容易找全有絲分裂過程中各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞。如果是這樣，可以慢慢地移動(dòng)裝片，從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。 |
分生區(qū)細(xì)胞特點(diǎn)是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞正處于分裂期。 |
討論：制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么？
答：制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點(diǎn)：（1）剪取洋蔥根尖材料時(shí)，應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時(shí)間；（2）解離時(shí)，要將根尖細(xì)胞殺死，細(xì)胞間質(zhì)被溶解，使細(xì)胞容易分離；（3）壓片時(shí)，用力的大小要適當(dāng)，要使根尖被壓平，細(xì)胞分散開。
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